سالمونلا شیگلا آگار
Ⅰ. بررسی اجمالی سالمونلا شیگلا آگار
Ⅱ. آماده سازی / ترکیب
Ⅲ. اصول SS Agar
Ⅳ. خواندن / تفسیر
Ⅰ. بررسی اجمالی سالمونلا شیگلا آکار
سالمونلا شیگلا آگار یا SS آگار یک محیط انتخابی و متمایز برای جداسازی باسیل های روده ای بیماری زا، به ویژه سالمونلا و شیگلا، از مدفوع، غذا و مواد بالینی است.
اصل ss agar بر این اساس استوار است:
- در مورد استفاده از نمک صفراوی، سیترات سدیم و سبز درخشان برای مهار باکتری های گرم مثبت.
- در مورد تخمیر لاکتوز و تولید سولفید هیدروژن (H2S) برای تمایز موجودات
Ⅱ. آماده سازی / ترکیب
اجزای تشکیل دهنده، را در آب حل کنید (63 گرم در 1000 میلی لیتر آب تصفیه شده / مقطر). بجوشانید و مرتباً هم بزنید تا محیط کاملاً حل شود. اتوکلاو نکنید یا بیش از حد گرم نکنید: گرمای بیش از حد می تواند گزینش پذیری محیط را از بین ببرد.
تا دمای 50 درجه سانتیگراد خنک کنید و در ظروف پتری بریزید.
| gram / litre | Ingredients | gram / litre | Ingredients |
|---|---|---|---|
| 2.5gr | Peptic digestion of animal tissues | 2.5gr | Pancreatic casein digestion |
| 10gr | Lactose | 5gr | Beef extract |
| 8.5gr | Sodium citrate | 8.5gr | Sodium thiosulphate |
| 1gr | Ferric Ammonium Citrate | 8.5gr | Bile salts |
| 0.025gr | Neutral red | 0.00033gr | Brilliant Green |
| 0.2 +/- 7.0 | pH final | 15gr | Agar |
Ⅲ. اصول SS Agar
◈ گزینش پذیری: گزینش پذیری این محیط بر اساس وجود نمک های سبز درخشان، سیترات سدیم و نمک های صفراوی است که به طور کامل از رشد باکتری های گرم مثبت و تا حدی از رشد انتروباکتریاسه و پروتئوس جلوگیری می کند.
◈ تمایز: تمایز موجودات روده ای در محیط SS توسط:
الحاق لاکتوز به محیط. ارگانیسم هایی که لاکتوز را تخمیر می کنند اسید تولید می کنند که در حضور نشانگر قرمز خنثی منجر به تشکیل کلونی های قرمز می شود. لاکتوز غیر تخمیری کلنی های بی رنگ را تشکیل می دهند
تمایز بیشتر بر اساس تولید سولفید هیدروژن (H2S) به لطف وجود تیوسولفات سدیم و سیترات آهن امکان پذیر است. منجر به ایجاد کلنی سیاه یا سیاه محور می شود.
توجه داشته باشید :
سالمونلا شیگلا آگار می تواند برخی از گونه های شیگلا مانند S. sonnei و S. dysenteriae را مهار کند.
تخمیرهای دیررس لاکتوز ممکن است به 48 ساعت انکوباسیون برای ایجاد واکنش رنگی در SS آگار نیاز داشته باشند.
Ⅳ. خواندن / تفسیر Salmonella Shigella Agar
◈ پس از 24 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد هوازی، به طور کلی:
کلنی های لاکتوز منفی بی رنگ هستند. کلنی های لاکتوز مثبت صورتی تا قرمز هستند. کلنی تولید کننده H2S یک مرکز سیاه دارند.
| Growth | Bacteria |
|---|---|
| colorless colony | Shigella spp. and Salmonella spp non-H2S producers. |
| Colonies with large black centers with a clear perimeter | Salmonella spp producing H2S. |
| Pink to red colony with or without an area of precipitated bile | Klebsiella |
| Translucent colonies, smaller than Salmonella, with a black center | Proteus |
| Partially or totally inhibited | Gram-positive |
موارد استفاده از محیط کشت سالمونلا شیگلا آگار
- به عنوان یک محیط انتخابی و افتراقی برای جداسازی سالمونلا و برخی گونه های شیگلا از نمونه های بالینی و غیر بالینی استفاده می شود.
- این محیط برای جداسازی اولیه شیگلا توصیه نمی شود.
- همچنین برای کمک به تمایز تخمیرکننده‌های لاکتوز و غیر لاکتوز از نمونه‌های بالینی، غذاهای مشکوک و سایر نمونه‌های مشابه ساخته شده است.
محدودیت های استفاده از SS Agar
- ادغام رنگ سبز درخشان در این محیط آن را بسیار انتخابی می کند و نشان داده شده است که رشد برخی از شیگلا را مهار می کند.
- نمک های صفراوی ممکن است در طول زمان متبلور شوند. آنها به صورت توپ های پف دار کوچک عنکبوت مانند در داخل محیط ظاهر می شوند و بر عملکرد محیط تأثیر نمی گذارند.
- برخی از سویه‌های شیگلا، مانند Shigella sonnei و S. dysenteriae ، ممکن است لاکتوز را نسبتاً آهسته تخمیر کنند و کلنی‌ها پس از کشت به مدت 2 روز یا بیشتر، به تخمیر لاکتوز تغییر کنند.
- ممکن است چند ارگانیسم غیر بیماری زا در سالمونلا شیگلا آگار رشد کنند.
- توصیه می شود برای شناسایی کامل، آزمایش بیوشیمیایی، ایمونولوژیک، مولکولی یا طیف سنجی جرمی روی کلنی های حاصل از کشت خالص انجام شود.
“کیمیا زیست گستر نوین” در راستای ارتقاء تولیدات و سطح علمی کشور مبادرت به واردات و توزیع مواد شیمیایی و مصرفی آزمایشگاهی کرده است. هدف مجموعه ما تأمين مواد و تجهيزات مورد نياز در بخش هاى مختلف آزمايشگاهى، تحقيقاتى، بيمارستانى، صنعتى و … مي باشد.
