بایل اسکولین آگار
Ⅰ. بررسی اجمالی بایل اسکولین آگار
Ⅱ. آماده سازی / ترکیب
Ⅲ. اصول
Ⅳ. تفسیر
Ⅰ. بررسی اجمالی محیط Bile Aesculin Agar
بایل اسکولین آگار یک محیط انتخابی و افتراقی است. این محیط توانایی موجودات زنده را برای هیدرولیز اسکولین در حضور صفرا (bile) آزمایش می کند. معمولاً برای شناسایی اعضای جنس استرپتوکوک و انتروکوک گروه D استفاده می شود. محیط BEA حاوی صفرا برای مهار رشد باکتری های گرم مثبت و همچنین بسیاری از باکتری های گرم منفی و اسکولین است که جزء افتراقی است. در برخی از آماده سازی ها، بایل اسکولین آگار ممکن است حاوی سدیم آزید باشد (انتخاب پذیری را افزایش می دهد)
Ⅱ. آماده سازی/ ترکیب
- اجزای تشکیل دهنده بایل اسکولین آگار ، را در آب حل کنید (64 گرم در 1000 میلی لیتر آب تصفیه شده/مقطر).
- محیط را با هم زدن مداوم حداقل به مدت 1 دقیقه به جوش بیاورید.
- در اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه استریل کنید.
- تا دمای 50-45 درجه سانتیگراد خنک کنید.
| Gram/liter | Ingredients |
|---|---|
| 11g | Beef extract |
| 34.5g | Enzymatic digestion of gelatin |
| 1g | Esculin |
| 0.05g | manganese sulfate |
| 2g | Ox bile |
| 0.5g | Ferric Ammonium Citrate |
| 15,0g | Agar |
Ⅲ. اصول
◈ پپتون ژلاتینی و عصاره گوشت گاو عناصر ضروری مورد نیاز برای رشد را فراهم می کند.
◈ تمایز: اگر ارگانیسمی بتواند اسکولین را در حضور صفرا هیدرولیز کند، محصول اسکولتین تشکیل می‌شود. اسکولتین با سیترات آهن (در وسط) واکنش نشان می‌دهد و یک کمپلکس آهن فنلی تشکیل می‌دهد که وسط را از قهوه‌ای تیره به سیاه تبدیل می‌کند.
◈ انتخاب‌پذیری: انتخاب‌پذیری با افزودن صفرا (oxgall) به‌دست می‌آید که رشد بیشتر کوکسی‌های گرم مثبت به غیر از استرپتوکوک‌ها و انتروکوک‌های گروه D را مهار می‌کند.
Ⅳ. تفسیر
◈ بعد از 18 تا 24 ساعت از نظر کلنی های مثبت اسکولیناز بررسی شود. قبل از گزارش منفی تا ۷۲ ساعت صبر کنید.
| Growth | Bacteria |
|---|---|
| Good growth. Positive esculin hydrolysis resulting in darkening of the medium around the growth | Enterococcus . |
| Good growth. No darkening of media around colonies | Escherichia coli |
| No growth | Streptococcus pyogenes |
- مثبت بودن تست لوله در محیط حاوی سیترات آمونیوم آهن با سیاه شدن محیط نشان داده می شود.
- آزمایش لوله منفی با عدم تغییر رنگ نشان داده می شود. محیط تحت نور UV (366 نانومتر) فلورسانس خواهد شد.
- برای اسکولین براث بدون سیترات آهن (III)، آزمایش مثبت یا با سیاه شدن محیط پس از افزودن معرف آهن [آهن(III)] یا با از دست دادن فلورسانس محیط نشان داده می شود.
- اگر ارگانیسم بدون در نظر گرفتن توانایی هیدرولیز اسکولین نتواند در حضور صفرا رشد کند، نتیجه آزمایش منفی نیز در محیط صفرا-اسکولین رخ می دهد.
- آزمایش دیسک مثبت با ایجاد رنگ قهوه ای تیره یا سیاه نشان داده می شود.
- تست منفی دیسک بی رنگ می ماند.
موارد استفاده از تست بایل اسکولین
- آزمایش اسکولین صفرا به عنوان یک آزمایش بیوشیمیایی برای جداسازی انتروکوک ها و استرپتوکوک های گروه D انجام می شود.
- همچنین می توان از آن برای تمایز این ارگانیسم ها از استرپتوکوک های viridans و سایر میکروارگانیسم های گرم مثبت استفاده کرد.
- Bile Esculin Agar یک محیط افتراقی انتخابی برای رشد ارگانیسم هایی مانند Enterococcia ،Listeria و Yersinia Enterocolitica است.
“کیمیا زیست گستر نوین” در راستای ارتقاء تولیدات و سطح علمی کشور مبادرت به واردات و توزیع مواد شیمیایی و مصرفی آزمایشگاهی کرده است. هدف مجموعه ما تأمين مواد و تجهيزات مورد نياز در بخش هاى مختلف آزمايشگاهى، تحقيقاتى، بيمارستانى، صنعتى و … مي باشد.
