محیط کشت قارچ

محیط کشت قارچ ها حاوی منبع کربوهیدرات زیاد، منبع نیتروژن برای رشد قارچ ها در اسیدیته 5تا6 است. اكثر قارچ ها در طبيعت وجود دارند و به سادگى بر روى منابع ساده حاوى نيتروژن و كربوهيدرات رشد مى كنند. به صورت سنتى براى رشد قارچ ها از سابرو آگار استفاده مى شود كه حاوى گلوكز و پپتون اصلاح شده‌است و اجازه رشد به باكترى ها را نمى دهد. از جمله محيط كشت قارچ مى توان به محيط PDA ،PDB و محيط هاى سنتزى اشاره كرد.

محیط های کشت برای جدا کردن قارچ ها:

اضافه نمودن آنتی بیوتیک های ضد میکروبی به Fungal culture media از رشد و نمو بسیاری از عناصر جلوگیری می کند.

محیط کشت قارچ ها دو نوع مى باشند:

• معمولى
• اختصاصی

تعدادی از محیط کشت قارچ

١- سابرو دکستروز آگار
۲- سابرو دکستروز آگاز کلرامفنیکل سیکلو هگزامید
۳- محیط عصاره ی مغز و قلب
۴- محیط خوندار
٥- محیط کورن میل آگار (C.M.A)

قارچ ها توانایی رشد در رطوبت کم را دارند. همچنین در مقابل pH پایین از خود مقاومت نشان می دهند. pH مناسب برای بیشتر گونه ها ٦/٥ می باشد و محدوده ی pH برای آنها بین ٢ تا ٩ است. قارچ ها نیاز به نیتروژن کمی دارند و تقریبا نیتروژن مورد نیاز آنها نصف باکتری ها است.

یک متخصص قارچ شناسی، کشت خالص یک قارچ را برای مطالعه دقیق قارچ در مورد تولید مثل، فیزیولوژی و ژنتیک آن استفاده می کند. کشت خالص ممکن است بر روی محیط جامد یا مایع باشد و در به دست آوردن کشت خالص ارگانیسم، قارچ شناس از روش خاصی استفاده می کند.

تهیه محیط کشت قارچ

تمیز کردن ظروف شیشه ایی:

تمام ظروف شیشه ای مورد استفاده در مطالعات میکروبیولوژیکی یا آسیب شناسی باید به طور سخت تمیز شوند. تمیز کردن اولیه باید با استفاده از برس و صابون انجام شود.

در نهایت می توان آنها را با مخلوط زیر شستشو داد:

این مخلوط را می توان چندین بار استفاده کرد. پس از شستشو با این مخلوط، ظروف شیشه ای را مدتی در آب لوله کشی شستشو دهید، سپس در نهایت با آب مقطر شستشو دهید و بگذارید تا در هوا خشک شود.

آماده‌سازی محیط

انتخاب محیط بستگی به نوع میکروارگانیسم مورد نظر برای رشد با در نظر گرفتن نیازهای تغذیه ای شکل خاص دارد. از میان تعداد زیادی از این محیط ها، برخی از آنها در زیر بیان شده‌است:

بر اساس قوام، محیط های کشت دو نوع هستند:

• محیط مایع

این محیط ها از نظر قوام مایع هستند و در مواردی استفاده می شود که رشد میکروبی به صورت خالص برای مطالعات بیشتر جدا شود.

• محیط جامد

محیط مایع را می توان با افزودن Agar-Agar، یک ماده ژله مانند استخراج شده از جلبک دریایی، Gelidium ، جامد کرد. افزودن حدود 1.5 درصد از این ماده در یا نزدیک به pH خنثی برای جامد ساختن محیط کافی است.

بر اساس ترکیب، محیط کشت قارچ ممکن است دو نوع باشد:

• محیط های طبیعی

برخی از نمونه های چنین محیطی Malt extract agar ،Soil extract agar ،Oat meal agar و Potato dextrose agar هستند. PDA معمولاً برای مطالعات فیتوپاتولوژیک استفاده می شود. ترکیب پوتیتو دکستروز آگار (PDA) در زیر آورده‌شده‌است:

* 4.0 گرم عصاره سیب زمینی معادل 200 گرم تزریق سیب زمینی است.

• محیط کشت سنتزی

نمونه هایی از محیط کشت سنتزی، Standard synthetic و Czapek-Dox media هستند که ترکیب آنها در زیر بیان شده‌است:

برای جلوگیری از رسوب بهتر است در انتها K2HPO4 یا KH2PO4 را اضافه کنید. pH محیط با افزودن محلول NaOH یا اسید سیتریک به مقدار لازم به میزان دلخواه تنظیم می شود.

استریل کردن محیط با اتوکلاو

محیط هایی که از آنها استفاده می شود باید در اتوکلاو به مدت 15 دقیقه با فشار 16 پوند بر اینچ در بخار استریل شوند. قبل از باز کردن اتوکلاو، اجازه داده‌شود فشار به صفر برسد. همچنین باید دقت داشت که محیط به دلیل داشتن آگار به سرعت با خنک شدن جامد می شود.

کشت محیط کشت قارچ

این باید در یک اتاق کشت استریل شده از طریق بخور گوگرد یا فرمالین انجام شود. میز که این فرایند باید روی آن انجام شود باید با یک تکه پنبه آغشته به الکل تمیز شود. محیط های کشت  را باید به یک اتاق کشت ببرید، پنبه را باز کنید، دهانه را به آرامی روی شعله گرم کنید، درب بالای ظرف پتری را کمی بالا بیاورید، محیط را داخل ظرف پتری ریخته، درپوش را عوض کرده و اجازه دهید محیط سرد شود. فرآیند کشت محیط باید در کمترین زمان ممکن انجام شود تا از هرگونه آلودگی جلوگیری شود. در حال حاضر، ظروف پتری دیش با محیط کشت آماده تلقیح با میکروارگانیسم هستند.

مطالب مفید:

“کیمیا زیست گستر نوین” در راستای ارتقاء تولیدات و سطح علمی کشور مبادرت به واردات و توزیع مواد شیمیایی و مصرفی آزمایشگاهی کرده است. هدف مجموعه ما تأمين مواد و تجهيزات مورد نياز در بخش هاى مختلف آزمايشگاهى، تحقيقاتى، بيمارستانى، صنعتى و … مي باشد.